本研究在酶消化法的基础上，通过比较不同的肝组织分离和培养条件，获得鲤鱼肝原代细胞培养的最佳培养方法和条件。首先，结合细胞数量和台盼蓝染色所得的细胞存活率，比较了胰蛋白酶消化鲤鱼肝组织的不同反应温度和时间，结果表明：肝组织用0.25%(m/V)胰蛋白酶在25℃消化40 min时细胞分离效果最好。其次，经酶消化得到的肝原代细胞粗制液，设置4种不同的细胞纯化和培养条件：1）将细胞直接重悬于含10%胚牛血清(FBS)的L-15/DMEM培养基中培养；2）以10%鲤鱼血清取代培养基中的胚牛血清重悬细胞并培养；3）将细胞经Percoll液密度梯度离心纯化后，重悬于含10%胚牛血清的L-15/DMEM培养基中培养；4）细胞经Percoll纯化后，重悬于含10%鲤鱼血清的L-15/DMEM培养基中培养。利用光学显微镜观察肝细胞的形态，进而通过HE染色法检测，结果表明经Percoll纯化后肝细胞纯度显著提高；采用MTS/PMS法检测肝细胞的增殖情况，结果表明鲤鱼血清代替胚牛血清培养细胞，肝细胞活力显著提高。本研究为建立稳定的毒理学肝原代细胞实验模型奠定基础。